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蕲蛇

蕲蛇

药材来源 中国药典2010年版一部

详细信息

蕲蛇

Qishe

AGKISTRODON

     本品为蝰科动物五步蛇Agkistrodon acutus(Guenther)的干燥体。多于夏、秋二季捕捉,剖开蛇腹,除去内脏,洗净,用竹片撑开腹部,盘成圆盘状,干燥后拆除竹片。

【性状】  本品卷呈圆盘状,盘径17~34cm,体长可达2m。头在中间稍向上,呈三角形而扁平,吻端向上,习称“翘鼻头”。上腭有管状毒牙,中空尖锐。背部两侧各有黑褐色与浅棕色组成的“V”形斑纹17~25个,其“V”形的两上端在背中线上相接,习称“方胜纹”,有的左右不相接,呈交错排列。腹部撑开或不撑开,灰白色,鳞片较大,有黑色类圆形的斑点,习称“连珠斑”,腹内壁黄白色,脊椎骨的棘突较高,呈刀片状上突,前后椎体下突基本同形,多为弯刀状,向后倾斜,尖端明显超过椎体后隆面。尾部骤细,末端有三角形深灰色的角质鳞片1枚。气腥,味微咸。
    【浸出物】  照醇溶性浸出物测定法(附录Ⅹ A)项下的热浸法测定,用稀乙醇作溶剂,不得少于10.0%。

饮片

【炮制】  蕲蛇  去头、鳞,切成寸段。
    蕲蛇肉  去头,用黄酒润透后,除去鳞、骨,干燥。
    酒蕲蛇  取蕲蛇段,照酒炙法(附录Ⅱ D)炒干。
    每100kg蕲蛇,用黄酒20kg。

本品为段状。棕褐色或黑色,略有酒气。

【鉴别】  聚合酶链式反应法。

模板DNA提取   取本品0.5g置乳钵中,加液氮适量,充分研磨使成粉末,取0.1g,置1.5ml离心管中,加入消化液275μl细胞核裂解液200μl,0.5mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液50μl,蛋白酶K(20mg/ml)20μl,RNA酶溶液5μl,在550C水浴保温1小时,加入裂解缓冲液250μl,混匀,加到DNA纯化柱中,离心(转速为每分钟10000转)3分钟;弃去过滤液,加入洗脱液800μl5mol/L醋酸钾溶液26μl,1mol/LTris-盐酸溶液(PH7.5)18μl,0.5mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液(PH8.0〕3μl,无水乙醇480μl,灭菌双蒸水273μl离心(转速为每分钟10000转)1分钟;充去过滤液,用上洗脱液反复洗脱3次,每次离心(转速为每分钟10000转)1分钟,充去过滤液,再离心2分钟,将DNA纯化柱转移入另一离心管中,加入无菌双蒸水100μl,室温放置2分钟后,离心(转速为每分钟10000转)2分钟,取上清液,作为供试品溶液,置零下200C保存备用.另取蕲蛇对照药材0.5g,同法制成对照药材模板DNA溶液。

PCR反应鉴别引物:5GGCAATTCACTACACAGCCAA-CATCAACT3`和5`CCATAGTCAGGTGGTTAGT

GATAC 3`。PCR反应何体系:

在200μl离心管中进行,反应总体积为25μl,反应体系包括10×PCR缓冲液2.5μl,dNTP(2.5mmol/L)2μl,鉴别引物(10μmmol/L)各0.5μl,高保真Taq DNA聚合酶(5U/μl)0.2μl,模板0.5μl,无菌双蒸水18.8μl.将离心管置PCR仪,PCR反应参数:950C预变性5分钟,循环反应30次(950C30秒,630C45秒),延伸(720C)5分钟。

电泳检测  照琼脂糖凝胶电泳法(三部附录ⅣB),胶浓度为1%,胶中加入核酸凝胶染色剂GelRed;供试品与对照药材PCR反应溶液的上样量分别为8μl,DNA分子量标记上样量为2μl(0.5μg/μl)。电泳结束后,取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中,在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上,在200~300bp应有单一DNA条带。
    【性味与归经】  甘、咸,温;有毒。归肝经。
    【功能与主治】  祛风,通络,止痉。用于风湿顽痹,麻木拘挛,中风口眼斜,半身不遂,抽搐痉挛,破伤风,麻风,疥癣。

【用法与用量】  3~9g,研末吞服,一次1~1.5g,一日2~3次。

【贮藏】  置干燥处,防霉,防蛀。

本文章由好中医|中医中药网 www.welltcm.com 整理编辑